Mauruuru koe mo te toro ki Nature.com. Ko te putanga pūtirotiro e whakamahia ana e koe he iti te tautoko CSS. Mo nga hua pai rawa atu, ka tūtohu matou kia whakamahi i tetahi kaitirotiro hou ake (ka whakakorehia ranei te aratau hototahi ki Internet Explorer). I tenei wa, hei whakarite i te tautoko tonu, ka whakaatuhia e matou te waahi kaore he momo me te JavaScript.
Ko te whakaturanga o nga tauira kararehe o te huringa rereke (MC) he kaupapa nui mo te ako i te MC. E rima tekau ma wha nga rapeti ma o Niu Tireni i wehea ki te roopu mahi-mahi, te roopu whakauru uaua (Me roopu) me te roopu whakato nucleus pulposus (roopu NPE). I roto i te roopu NPE, i whakaatuhia te kopae intervertebral e te huarahi pokanga anterolateral lumbar me te ngira i whakamahia hei wero i te tinana vertebral L5 e tata ana ki te pereti mutunga. Ko te NP i tangohia mai i te L1 / 2 intervertebral disc e te syringe ka werohia ki roto. Te keri poka i te koiwi subchondral. Ko nga mahi pokanga me nga tikanga keri i roto i te roopu whakauru uaua me te roopu mahi whakahiato he rite tonu ki era i roto i te roopu whakauru NP. I roto i te roopu ME, i whakauruhia he wahi uaua ki roto i te poka, i te roopu mahi whakahiato, kaore he mea i whakauruhia ki roto i te poka. I muri i te mahi, i mahia te tirotiro MRI me te whakamatautau koiora irapoi. I huri te tohu i roto i te roopu NPE, engari kaore i kitea he huringa tohu i roto i te roopu mahi-whakawai me te roopu ME. Ko te tirohanga o te hitori i whakaatu ko te tipu o te kikokiko rereke i kitea i te waahi whakauru, a, ko te korero o IL-4, IL-17 me IFN-γ i piki ake i roto i te roopu NPE. Ko te whakauru o te NP ki roto i te wheua subchondral ka taea te hanga i te tauira kararehe o te MC.
Ko nga huringa rereke (MC) he whiu o nga papaa vertebral endplates me te hinu wheua e tata ana ka kitea i runga i te whakaata resonance imaging (MRI). He mea tino noa ki nga tangata takitahi e whai tohu ana1. He maha nga rangahau i whakanui i te hiranga o te MC na tona hononga ki te mamae iti (LBP)2,3. de Roos et al.4 me Modic et al.5 motuhake i whakaahua tuatahi e toru nga momo rereke o te tohu tohu subchondral i roto i te wheua wheua vertebral. Ko nga huringa Modic momo I he hypointense i runga i nga raupapa T1-weighted (T1W) me te hyperintense i runga i nga raupapa T2-weighted (T2W). Ka kitea e tenei whiu nga papaa kawa me te kiko kirikiri kiko i roto i te hinu wheua. Ko nga huringa momo II e whakaatu ana i nga tohu teitei i runga i nga raupapa T1W me T2W. I roto i tenei momo whiu, ka kitea te whakangaromanga o te pereti mutunga, me te whakakapinga ngako hihiko o te hinu wheua e tata ana. Ko nga huringa momo III e whakaatu ana i te tohu iti i roto i nga raupapa T1W me T2W. Kua kitea nga whiu sclerotic e rite ana ki nga papa mutunga6. Ko te MC e kiia ana he mate pathological o te tuara me te hono tata ki te maha o nga mate degenerative o te tuara7,8,9.
Ma te whakaaro ki nga raraunga e waatea ana, he maha nga rangahau i whakarato i nga maaramatanga mo te etiology me nga tikanga pathological o MC. Albert et al. Ko te whakaaro ko te MC pea na te kopae kopae8. Hu et al. i kii a MC ki te paheketanga o te kōpae10. I whakaarohia e Kroc te ariā o te "waha o roto o te kōpae," e kii ana ko te mamae o te kōpae tukurua ka arahi pea ki te microtears i te papa mutunga. I muri i te hanganga o te kowhatu, ka pakaru te pereti mutunga e te nucleus pulposus (NP) ka puta he urupare autoimmune, e arai atu ana ki te whanaketanga o te MC11. Ma et al. He rite tonu te whakaaro me te kii ko te autoimmunity-induced NP he mahi nui ki te pathogenesis o MC12.
Ko nga pūtau o te punaha mate, ina koa ko nga lymphocytes kaiawhina CD4+ T, ka whai waahi nui ki te pathogenesis o te autoimmunity13. Ko te waahanga hou Th17 i kitea tata nei ka whakaputa i te cytokine proinflammatory IL-17, e whakatairanga ana i te whakaaturanga chemokine, me te whakaihiihi i nga pūtau T i roto i nga whekau pakaru ki te whakaputa IFN-γ14. Ko nga pūtau Th2 ano he mahi ahurei i roto i te pathogenesis o nga urupare aukati. Ko te whakapuakitanga o te IL-4 hei tohu mo te pūtau Th2 ka puta he huanga mate immunopathological15.
Ahakoa he maha nga rangahau haumanu i whakahaeretia i runga i te MC16,17,18,19,20,21,22,23,24, kei te kore tonu nga tauira whakamatautau kararehe e tika ana hei whakatauira i te tukanga MC e puta pinepine ana i roto i te tangata ka taea i whakamahia ki te tirotiro i te etiology, i nga maimoatanga hou penei i te rongoa kua whakaritea. I tenei wa, he torutoru noa nga tauira kararehe o te MC kua korerohia ki te ako i nga tikanga pathological o raro.
I runga i te ariā autoimmune i whakaarohia e Albert raua ko Ma, i whakatauhia e tenei rangahau he tauira MC rapeti ngawari me te whakahoki ano ma te whakawhiti aunoa i te NP tata ki te pereti mutunga o te vertebral kua werohia. Ko etahi atu kaupapa ko te tirotiro i nga ahuatanga o te hitori o nga tauira kararehe me te arotake i nga tikanga motuhake o te NP i te whanaketanga o te MC. Ki tenei mutunga, ka whakamahia e matou nga tikanga penei i te koiora irapoi, MRI, me nga rangahau hitori ki te ako i te ahunga whakamua o te MC.
E rua nga rapeti i mate i te toto i te wa e pokai ana, e wha nga rapeti i mate i te wa o te rewharewha i te MRI. Ko te toenga o nga rapeti e 48 i ora, karekau he tohu whanonga, tohu neurological ranei i muri i te pokanga.
Ko te MRI e whakaatu ana he rereke te kaha o te tohu o te kiko kua whakauruhia ki roto i nga rua rereke. Ko te kaha o te tohu o te tinana vertebral L5 i roto i te roopu NPE ka huri haere i te 12, 16 me te 20 wiki i muri i te whakauru (ko te raupapa T1W i whakaatu i te tohu iti, me te raupapa T2W i whakaatu i te tohu whakauru me te tohu iti) (Fig. 1C), i te wa e whakaatu ana nga ahua MRI o era atu roopu e rua o nga waahanga kua mau tonu i te wa ano (Fig. 1A, B).
(A) Mangai raupapa MRI o te rapeti lumbar spine i nga wa 3 wa. Karekau he tohu rerekee i kitea i roto i nga whakaahua o te roopu mahi whakahiato. (B) Ko nga tohu tohu o te tinana vertebral i roto i te roopu ME he rite ki era i roto i te roopu mahi sham, a kaore he huringa tohu nui e kitea ana i te waahi whakauru i te wa. (C) I roto i te roopu NPE, ka tino kitea te tohu iti i roto i te raupapa T1W, me te tohu whakauru me te tohu iti ka tino kitea i roto i te raupapa T2W. Mai i te 12-wiki ki te 20-wiki, ka heke iho nga tohu teitei e karapoti ana i nga tohu iti i roto i te raupapa T2W.
Ka taea te kite i te hyperplasia wheua kitea i te waahi whakauru o te tinana vertebral i roto i te roopu NPE, a ka tere ake te tipu o te wheua mai i te 12 ki te 20 wiki (Fig. 2C) i whakaritea ki te roopu NPE, kaore he huringa nui i kitea i roto i te vertebral tauira. tinana; Ko te roopu Sham me te roopu ME (Fig. 2C) 2A,B).
(A) Ko te mata o te tinana o te vertebral i te waahanga kua whakatohia he tino maeneene, he pai te rongoa o te poka, a, kaore he hyperplasia i roto i te tinana vertebral. (B) Ko te ahua o te waahi i whakatohia i roto i te roopu ME he rite tonu ki tera i roto i te roopu mahi horihori, a kaore he rereketanga o te ahua o te waahi i whakatohia i te wa. (C) I puta te hyperplasia wheua i te waahi i whakatohia i roto i te roopu NPE. Ka tere te piki haere o te hyperplasia o te wheua, ka toro atu i roto i te kōpae intervertebral ki te tinana vertebral contralateral.
Ko te tātaritanga hitori e whakarato ana i nga korero mo te hanga wheua. Ko te Whakaaturanga 3 e whakaatu ana i nga whakaahua o nga waahanga i muri i te mahi kua pania ki te H&E. I roto i te roopu mahi sham, he pai te whakarite o nga chondrocytes, kaore i kitea te tipu o te pūtau (Fig. 3A). Ko te ahuatanga o te roopu ME i rite ki tera i roto i te roopu mahi whakahianga (Fig. 3B). Engari, i roto i te roopu NPE, he nui te maha o nga chondrocytes me te tipu o nga pūtau NP-rite i kitea i te waahi whakauru (Fig. 3C);
(A) Ka kitea te Trabeculae tata ki te pereti mutunga, he pai te whakarite o nga chondrocytes me te rite o te rahi me te ahua o nga pūtau, kaore he tipu (40 nga wa). (B) Ko te ahua o te waahi whakaurunga i roto i te roopu ME he rite ki te ahua o te roopu sham. Ka kitea nga Trabeculae me nga chondrocytes, engari kaore he tipu i te waahi whakauru (40 nga wa). (B) Ka kitea he nui te tipu o te chondrocytes me te NP-rite, me te ahua me te rahi o te chondrocytes he koretake (40 nga wa).
Ko te whakaaturanga o te interleukin 4 (IL-4) mRNA, interleukin 17 (IL-17) mRNA, me te interferon γ (IFN-γ) mRNA i kitea i roto i nga roopu NPE me ME. I te whakatauritehia nga taumata whakahuatanga o nga ira ira, kua tino piki ake nga whakaaturanga ira o IL-4, IL-17, me IFN-γ i roto i te roopu NPE i whakaritea ki era o te roopu ME me te roopu mahi sham (Fig. 4) (P <0.05). I whakaritea ki te roopu mahi sham, ko nga taumata whakapuaki o IL-4, IL-17, me IFN-γ i roto i te roopu ME ka piki noa atu, kaore i tae ki te huringa tatauranga (P> 0.05).
Ko te whakaaturanga mRNA o IL-4, IL-17 me IFN-γ i roto i te roopu NPE i whakaatu i te ahua tino nui ake i era i roto i te roopu mahi sham me te roopu ME (P <0.05).
Engari, ko nga taumata korero i roto i te roopu ME kaore he rereketanga nui (P> 0.05).
I mahia te tātaritanga blot ki te hauauru ma te whakamahi i nga irirangi e waatea ana ki te hokohoko ki te IL-4 me te IL-17 hei whakau i te tauira whakahuatanga mRNA kua whakarereketia. Kei te whakaatuhia i roto i nga Whakaahua 5A,B, i whakaritea ki te roopu ME me te roopu mahi sham, ko nga taumata pūmua o IL-4 me IL-17 i roto i te roopu NPE i tino piki ake (P <0.05). Ki te whakatauritea ki te roopu mahi horihori, ko nga taumata pūmua o te IL-4 me te IL-17 i roto i te roopu ME kaore i eke ki nga huringa nui (P> 0.05).
(A) Ko nga taumata o te pūmua o te IL-4 me te IL-17 i roto i te roopu NPE i tino nui ake i era i roto i te roopu ME me te roopu placebo (P <0.05). (B) Hetogram blot Western.
Na te iti o te maha o nga tauira tangata i whiwhi i te wa o te pokanga, he maamaa nga rangahau mo te pathogenesis o te MC he uaua. I ngana matou ki te whakatu i tetahi tauira kararehe o MC ki te ako i ona tikanga pathological pea. I te wa ano, i whakamahia te aromatawai reo irirangi, te arotake histological me te aromatawai koiora molecular ki te whai i te akoranga o te MC i whakaawehia e te NP autograft. Ko te hua o tenei, ko te tauira whakaurunga NP i puta te whakarereketanga o te kaha o te tohu mai i te 12-wiki ki te 20-wiki nga waahi (he iti te whakauru o te tohu i roto i nga raupapa T1W me te tohu iti i roto i nga raupapa T2W), e tohu ana i nga huringa o te kikokiko, me te hihiko me te molecular. i whakamanahia e nga aromatawai koiora nga hua o te rangahau radiological.
Ko nga hua o tenei whakamatautau e whakaatu ana i puta nga huringa tirohanga me te hitori i te waahi o te takahi o te tinana vertebral i roto i te roopu NPE. I te wa ano, i kitea te whakaaturanga o nga ira IL-4, IL-17 me IFN-γ, me IL-4, IL-17 me IFN-γ, e tohu ana ko te takahi o te kiko o te nucleus pulposus autologous i roto i te vertebral. ka puta pea i te tinana he raupapa tohu me nga huringa ahua. He mea ngawari ki te kite ko nga tohu tohu o nga tinana vertebral o te tauira kararehe (tohu iti i roto i te raupapa T1W, tohu whakauru me te tohu iti i roto i te raupapa T2W) he tino rite ki nga ahuatanga o nga kamera vertebral tangata, me nga ahuatanga MRI hoki. whakaū i nga kitenga o te histology and gross anatomy, ara, kei te ahu whakamua nga huringa o nga ruma o te tinana vertebral. Ahakoa ka puta te urupare mumura na te whara kino i muri tata mai i te werohanga, ka kitea e nga hua o te MRI ko te piki haere o nga huringa tohu ka puta i nga wiki 12 i muri i te werohanga me te mau tonu ki te 20 wiki kaore he tohu o te whakaora, te hurihanga ranei o nga huringa MRI. Ko enei hua e whakaatu ana ko te NP vertebral autologous he tikanga pono mo te whakatuu MV ahu whakamua i roto i nga rapeti.
Ko tenei tauira werohanga e tika ana te mohio, te wa, me te mahi pokanga. I roto i nga whakamatautau tuatahi, ko te wehewehe, ko te whakaihiihi nui ranei o nga hanganga paravertebral ligamentous ka puta pea te hanganga o nga osteophytes vertebral. Kia tupato kei kino, kei whakapataritari ranei i nga kopae e tata ana. I te mea me whakahaere te hohonutanga o te kuhu kia puta ai nga hua riterite me te whakaputa ano, ka mahia a ringatia e matou he mono ma te tapahi i te takotoranga o te ngira 3 mm te roa. Ma te whakamahi i tenei mono ka whakarite kia rite te hohonu o te keri i roto i te tinana vertebral. I roto i nga whakamatautau tuatahi, e toru nga taote orthopedic i uru ki te mahi i kitea nga ngira 16-mehua ngawari ki te mahi i nga ngira 18-mehua, etahi atu tikanga ranei. Hei karo i te nui o te toto i te wa e keri ana, ma te pupuri tonu i te ngira mo te wa poto ka puta he poka whakauru pai ake, e tohu ana ka taea te whakahaere i tetahi tohu MC penei.
Ahakoa he maha nga rangahau i aro ki te MC, he iti te mohio mo te etiology me te pathogenesis o MC25,26,27. I runga i o maatau rangahau o mua, i kitea e maatau he mahi nui te autoimmunity ki te puta me te whanaketanga o te MC12. I tirotirohia e tenei rangahau te whakaaturanga ine o IL-4, IL-17, me IFN-γ, ko nga huarahi rerekee matua o nga CD4 + i muri i te whakaongaonga antigen. I roto i ta maatau rangahau, i whakaritea ki te roopu kino, ko te roopu NPE he korero teitei ake o IL-4, IL-17, me IFN-γ, me nga taumata pūmua o te IL-4 me te IL-17 i teitei ake.
Ma te haumanu, ka piki ake te whakaaturanga mRNA IL-17 i roto i nga pūtau NP mai i nga turoro me te herniation disc28. Ko te piki ake o te IL-4 me te IFN-γ taumata i kitea i roto i te tauira whakapeka kore-compressive disc herniation whakaritea ki te mana hauora29. Ko te IL-17 he mahi nui i roto i te mumura, te whara o te kiko i roto i nga mate autoimmune30 me te whakarei ake i te urupare aukati ki te IFN-γ31. Kua whakaatuhia te whara o te kiko IL-17-whakatairanga i roto i te MRL/lpr mice32 me te autoimmunity-susceptible kiore33. Ka taea e IL-4 te whakakore i te whakapuakitanga o nga cytokines proinflammatory (penei i te IL-1β me te TNFα) me te macrophage activation34. I korerohia he rereke te korero mRNA o IL-4 i roto i te roopu NPE i whakaritea ki te IL-17 me te IFN-γ i te wa kotahi; Ko te whakaaturanga mRNA o IFN-γ i roto i te roopu NPE i tino nui ake i tera i era atu roopu. Na reira, ko te hanga IFN-γ pea he kaitakawaenga o te urupare inflammatory i whakaawehia e te NP intercalation. Kua whakaatuhia e nga rangahau ko te IFN-γ e hangaia ana e nga momo pūtau maha, tae atu ki te momo 1 kaiawhina T nga pūtau, nga pūtau whakamate taiao, me nga macrophages35,36, a he cytokine pro-inflammatory matua e whakatairanga ana i nga urupare aukati37.
Ko tenei rangahau e whakaatu ana ka uru pea te urupare autoimmune ki te puta me te whanaketanga o te MC. Luoma et al. i kitea he rite nga tohu tohu o te MC me te NP rongonui i runga i te MRI, me te whakaatu i nga tohu nui e rua i roto i te raupapa T2W38. Ko etahi o nga cytokines kua whakapumautia he hononga tata ki te puta o te MC, penei i te IL-139. Ma et al. Ko te whakaaro ko te toronga whakarunga, whakararo ranei o te NP ka whai mana nui ki te puta me te whanaketanga o te MC12. Ko Bobechko40 me Herzbein et al.41 i kii ko te NP he kopa immunotolerant e kore e taea te uru ki te tohanga toto mai i te whanautanga. Ko nga tohu NP ka whakauru i nga tinana ke ki roto i te tuku toto, na reira ka takawaenga i nga tauhohenga autoimmune rohe42. Ka taea e nga tauhohenga autoimmune te whakaawe i te maha o nga mea aukati, a, ka mau tonu enei mea ki nga kopa, ka puta he huringa o te tohu43. I roto i tenei rangahau, ko te whakawhitinga ake o te IL-4, IL-17 me te IFN-γ ko nga ahuatanga o te mate pukupuku, e whakaatu ana i te hononga tata i waenga i te NP me te MCs44. He pai te ahua o tenei tauira kararehe i te pakaruhanga NP me te urunga ki te pereti mutunga. Ko tenei tukanga i whakaatu ake i te paanga o te autoimmunity ki te MC.
I te mea e tumanakohia ana, ko tenei tauira kararehe e whakarato ana ki a tatou he waahi hei ako i te MC. Heoi ano, he herenga tonu tenei tauira: tuatahi, i te wa e tirotirohia ana nga kararehe, me whakakorehia etahi rapeti takawaenga mo te whakamatautau koiora me te koiora irapoi, no reira ka "kore" etahi kararehe i te waa. Tuarua, ahakoa e toru nga waahi kua whakaritea i roto i tenei rangahau, engari, kotahi noa te momo MC (Modic type I te huri) i whakatauirahia e matou, no reira kaore e ranea te tohu mo te whanaketanga o te mate tangata, me etahi atu wa e tika ana kia whakaritea. pai ake te titiro ki nga huringa tohu katoa. Tuatoru, ko nga huringa i roto i te hanganga kiko ka taea te whakaatu ma te whakamaaramatanga o mua, engari ko etahi tikanga motuhake ka pai ake te whakaatu i nga huringa microstructural o tenei tauira. Hei tauira, i whakamahia te moroiti marama polarized ki te wetewete i te hanganga o te fibrocartilage i roto i nga kopae intervertebral rapeti45. Ko nga paanga mo te wa roa o te NP i runga i te MC me te pereti mutunga me rangahau ano.
E rima tekau ma wha nga rapeti ma o Niu Tireni (he 2.5-3 kg te taumaha, 3-3.5 marama te pakeke) i wehea matapōkeretia ki te roopu mahi sham, te roopu whakatō uaua (roopu ME) me te roopu whakato pakiaka nerve (roopu NPE). Ko nga tikanga whakamatautau katoa i whakaaetia e te Komiti Matatika o Tianjin Hospital, a ko nga tikanga whakamatautau i mahia i runga i nga tikanga kua whakaaetia.
Ko etahi o nga whakapainga kua mahia ki te tikanga pokanga a S. Sobajima 46 . I whakanohohia ia rapeti ki roto i te tuunga whakamuri o te taha me te mata o mua o nga kōpae intervertebral lumbar e rima karapīpiti (IVDs) i kitea ma te whakamahi i te huarahi retroperitoneal posterolateral. I whakawhiwhia ia rapeti i te mate whakamihi (20% urethane, 5 ml/kg ma te uaua taringa). I mahia he tapahi kiri roa mai i te taha o raro o nga rara tae noa ki te riu pelvic, 2 cm te puku ki nga uaua paravertebral. Ko te tuaiwi anterolateral matau mai i te L1 ki te L6 i kitea e te werohanga koi me te pupuhi o te kiko o raro o te kiri, te kiko retroperitoneal, me nga uaua (Fig. 6A). I whakatauhia te taumata o te kōpae ma te whakamahi i te pelvic brim hei tohu tohu mo te taumata kōpae L5-L6. Whakamahia he ngira wero 16 ine ki te keri i tetahi poka e tata ana ki te pereti pito o te vertebra L5 kia 3 mm te hohonu (Whakaahua 6B). Whakamahia he syringe 5-ml ki te aspirate i te autologous nucleus pulposus i roto i te kōpae intervertebral L1-L2 (Fig. 6C). Tangohia te nucleus pulposus, te uaua ranei i runga i nga whakaritenga o ia roopu. I muri i te whakahohonutanga o te poka keri, ka utaina he tui ki runga i te whascia hohonu, te papapapa me te kiri, kia tupato kei kino te kiko periosteal o te tinana vertebral i te wa o te pokanga.
(A) Ko te kōpae L5-L6 ka kitea ma te huarahi retroperitoneal posterolateral. (B) Whakamahia he ngira 16 ine ki te keri i tetahi poka e tata ana ki te papa mutunga L5. (C) Kua hauhakehia nga MF Autologous.
I whakahaerehia te mate pukupuku whanui me te 20% urethane (5 ml / kg) i tukuna ma te uaua o te taringa, me te reo irirangi o te lumbar spine i te 12, 16, me te 20 wiki i muri i te mahi.
I patua nga rapeti ma te werohanga intramuscular o te ketamine (25.0 mg/kg) me te konutai pentobarbital (1.2 g/kg) i te 12, 16 me te 20 wiki i muri i te pokanga. I tangohia te tuaiwi katoa mo te tātaritanga histological me te tino tātaritanga i mahia. I whakamahia te whakamaoritanga whakamuri ine (RT-qPCR) me te blotting ki te Hauauru ki te kite i nga huringa o nga mea aukati.
I mahia nga whakamatautau MRI i roto i nga rapeti ma te whakamahi i te 3.0 T haumanu haumanu (GE Medical Systems, Florence, SC) kua mau ki te kaikawe porowhita orthogonal limb coil. Ko nga räpeti i whakamomori ki te 20% urethane (5 mL/kg) ma te uaua o te taringa, katahi ka tuu ki roto i te aukume me te rohe lumbar e aro ana ki te porohita porohita porohita 5-inihi te whanui (GE Medical Systems). Ko nga whakaahua a Coronal T2-weighted localizer (TR, 1445 ms; TE, 37 ms) i riro hei tautuhi i te waahi o te kōpae lumbar mai i L3-L4 ki L5-L6. Ko nga poro T2-taimaha o te rererangi Sagittal i riro mai me nga tautuhinga e whai ake nei: te raupapa hurihuri-echo tere me te wa tukurua (TR) o 2200 ms me te wa echo (TE) o 70 ms, matrix; mara tirohanga o te 260 me te waru o nga whakaoho; Ko te matotoru tapahi he 2 mm, ko te mokowhiti he 0.2 mm.
Whai muri i te tangohanga o te whakaahua whakamutunga, ka patua te rapeti whakamutunga, ka tangohia nga kopae hiako, nga uaua-whakamau, me nga kōpae NP mo te tirotiro i te hitori. I mauhia nga kopa ki roto i te 10% okawa kua paopaohia mo te 1 wiki, kua whakakorehia ki te waikawa ethylenediaminetetraacetic, me te wahanga paraffin. Ka mauhia nga poraka kiko ki roto i te paraffin ka tapahia ki nga wahanga sagittal (5 μm te matotoru) ma te whakamahi i te microtome. I pania nga waahanga ki te hematoxylin me te eosin (H&E).
I muri i te kohikohi i nga kopae intervertebral mai i nga rapeti i ia roopu, ka tangohia te RNA katoa ma te whakamahi i te pourangi UNIQ-10 (Shanghai Sangon Biotechnology Co., Ltd., Haina) i runga i nga tohutohu a te kaihanga me te punaha whakamuri ImProm II (Promega Inc. , Madison, WI, USA). I mahia te tuhi whakamuri.
I mahia te RT-qPCR ma te whakamahi i te Prism 7300 (Applied Biosystems Inc., USA) me te SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) kia rite ki nga tohutohu a te kaihanga. Ko te rōrahi tauhohenga PCR he 20 μl me te 1.5 μl o te cDNA kua diluted me te 0.2 μM o ia tuatahi. I hangaia e OligoPerfect Designer (Invitrogen, Valencia, CA) nga kaupapa tuatahi me te hangaia e Nanjing Golden Stewart Biotechnology Co., Ltd. (Haina) (Ripanga 1). I whakamahia nga tikanga paihikara waiariki e whai ake nei: te hikoi whakakorikori polymerase tuatahi i te 94°C mo te 2 min, ka 40 nga huringa o te 15 s ia i te 94°C mo te denaturation tauira, te annealing mo te 1 min i te 60°C, te toronga, me te fluorescence. ka mahia nga inenga mo te 1 meneti i te 72°C. Ko nga tauira katoa i whakanuia e toru nga wa ka whakamahia te uara toharite mo te tātari RT-qPCR. I tātarihia nga raraunga whakakaha ma te whakamahi i te FlexStation 3 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA). Ko te IL-4, IL-17, me te IFN-γ whakaaturanga ira i whakaritea ki te mana endogenous (ACTB). Ko nga taumata whakahuatanga o te mRNA whainga i tatauhia ma te whakamahi i te tikanga 2-ΔΔCT.
Ko te katoa o te pūmua i tangohia mai i nga kopa ma te whakamahi i te homogenizer kiko i roto i te RIPA lysis buffer (kei roto he protease me te phosphatase inhibitor cocktail) katahi ka centrifuged i te 13,000 rpm mo te 20 min i te 4°C hei tango i nga otaota kiko. E rima tekau micrograms o te pūmua i utaina mo ia ara, ka wehea e te 10% SDS-PAGE, katahi ka whakawhitia ki te kiriuhi PVDF. I mahia te aukati i roto i te 5% miraka maroke kore ngako i roto i te Tris-buffered saline (TBS) kei roto 0.1% I waenganui i te 20 mo te 1 haora i te pāmahana rūma. I whakakororiahia te membrane ki te rapeti anti-decorin antibody tuatahi (diluted 1:200; Boster, Wuhan, Haina) (diluted 1:200; Bioss, Beijing, China) i te po i te 4°C ka tauhohe i nga ra tuarua; me te antibody tuarua (koati anti-rabbit immunoglobulin G i te 1:40,000 dilution) me te horseradish peroxidase (Boster, Wuhan, Haina) mo te 1 haora i te pāmahana rūma. I kitea nga tohu paraka o te Hauauru na te piki ake o te chemiluminescence i runga i te membrane chemiluminescent i muri i te whakamaaramatanga o te hihi X-ray. Mo te tātaritanga densitometric, i karapahia nga parapara me te ine ma te whakamahi i te rorohiko BandScan me nga hua i whakaatuhia ko te ōwehenga o te mate immunoreactivity ira ki te tubulin immunoreactivity.
I mahia nga tatauranga tatauranga ma te whakamahi i te kete rorohiko SPSS16.0 (SPSS, USA). Ko nga raraunga i kohia i te wa o te rangahau i tohuhia ko te toharite ± inenga paerewa (te tikanga ± SD) ka tātarihia ma te whakamahi i nga ine ine-a-tahi-a-te-a-ringa mo te rereketanga (ANOVA) hei whakatau i nga rereketanga i waenga i nga roopu e rua. Ko te P <0.05 i whakaarohia he tino nui.
Na, ko te whakaturanga o te tauira kararehe o te MC ma te whakauru i nga NP autologous ki roto i te tinana vertebral me te mahi i te tirohanga macroanatomical, te tātari MRI, te arotake histological me te tātari koiora irapoi hei taputapu nui mo te aromatawai me te mohio ki nga tikanga o te MC tangata me te whakawhanake i te rongoa hou. wawaotanga.
Me pehea te tuhi i tenei tuhinga: Han, C. et al. Ko te tauira kararehe o nga huringa Modic i whakauhia ma te whakauru i te autologous nucleus pulposus ki roto i te wheua subchondral o te tuara lumbar. Sci. Rep. 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
Weishaupt, D., Zanetti, M., Hodler, J., me Boos, N. Ataahua resonance aukume o te hiku o te lumbar: te nui o te whakaheke me te pupuri i te kōpae, te pupuhi pakiaka nerve, te rerekee o te pereti mutunga, me te osteoarthritis hononga taha i roto i nga kaitoi asymptomatic. . reiti. Radiology 209, 661–666, doi:10.1148/radiology.209.3.9844656 (1998).
Kjaer, P., Korsholm, L., Bendix, T., Sorensen, JS, me Leboeuf-Eed, K. Modic huringa me to raatau hononga ki nga kitenga haumanu. European Spine Journal: te whakaputanga mana o te European Spine Society, te European Society of Spinal Deformity, me te European Society for Cervical Spine Research 15, 1312-1319, doi: 10.1007 / s00586-006-0185-x (2006).
Kuisma, M., et al. Ko nga huringa rereke i roto i nga pito o te vertebral lumbar: te nui me te hononga ki te mamae iti me te sciatica i roto i nga kaimahi tane-pakeke. Hiwi 32, 1116–1122, doi:10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
de Roos, A., Kressel, H., Spritzer, K., me Dalinka, M. MRI o nga huringa o te wheua wheua e tata ana ki te pereti mutunga i roto i te mate degenerative o te lumbar spine. AJR. American Journal of Radiology 149, 531–534, doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
Modic, MT, Steinberg, PM, Ross, JS, Masaryk, TJ, me Carter, JR Degenerative disc mate: te aromatawai i nga huringa o te hinu vertebral me te MRI. Radiology 166, 193–199, doi:10.1148/radiology.166.1.3336678 (1988).
Modic, MT, Masaryk, TJ, Ross, JS, me Carter, JR Whakaahua o te mate pukupuku degenerative. Radiology 168, 177–186, doi: 10.1148/radiology.168.1.3289089 (1988).
Jensen, TS, et al. Ka huri nga tohu tohu o te neovertebral endplate (Modic) i te taupori whanui. European Spine Journal: Whakaputa Whaimana a te European Spine Society, te European Society of Spinal Deformity, me te European Society for Cervical Spine Research, Division 19, 129-135, doi: 10.1007 / s00586-009-1184-5 (2010).
Albert, HB me Mannisch, K. Modic huringa i muri i te herniation kōpae lumbar. European Spine Journal : Whakaputa Mana o te Pakeha Spine Society, te European Society of Spinal Deformity me te European Society for Cervical Spine Research 16, 977-982, doi: 10.1007 / s00586-007-0336-8 (2007).
Kerttula, L., Luoma, K., Vehmas, T., Gronblad, M., me Kaapa, E. Modic momo I huringa e taea te matapae tere haere whakamua deformational disc deformational: he rangahau 1-tau. Te Tuhituhi Hikoi a te Pakeha 21, 1135–1142, doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
Hu, ZJ, Zhao, FD, Fang, XQ me Fan, SW Nga huringa rereke: nga take ka taea me te awhina ki te whakahekenga o te kōpae lumbar. Nga Whakaaro Hauora 73, 930–932, doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
Krok, HV Te pakaru o roto o te kōpae. Ko nga raruraru whakaheke i te kōpae neke atu i te 50 tau. Tuakiri (Phila Pa 1976) 11, 650–653 (1986).
Wā tuku: Tihema-13-2024